二代測序 QC 全流程，快來看看適合你的QC方案?。?！

閱讀：29發布時間：2020/12/21

二代測序(NGS)的建庫流程是很長很復雜的，建庫的每一步都建立在前一步的基礎上，因而質量控制（QC）顯得尤為重要。無論您的初始樣本類型是什么，在整個實驗流程中，確保靶標的完整性、大小和集中程度是構建高質量文庫，進而獲得準確、可重復的結果的關鍵。為了幫助您更好地確定實驗流程，安捷倫匯總了各類初始樣本的各種建庫流程。

快來尋找你的專屬路線圖吧！

測序過程中的關鍵 QC 步驟

• Fragmentation

片段化是將樣本剪切成更小的片段的過程。可以通過酶切或超聲的方法來實現。QC 是這里的一個重要步驟，以確保片段化的條件是合適的。

• Ligate adaptors

接頭是已知的寡核苷酸序列，用于連接到未知的目標測序片段，提供測序引物結合區和樣本識別碼。接頭連接后的 QC 可以確保接頭成功連接到 DNA。

• Size selection

片段篩選的目的是去掉多余的引物和接頭序列，獲得需要的目標序列。QC 在這一步是至關重要的，可以確保后留下的是目標大小和足夠濃度的文庫。

• Normalize/pool

在文庫制備結束時，必須對樣本進行量化，以確定要加載到測序儀上的文庫量。如果需要多個文庫混合上機測序，QC 可以幫助提供稀釋指導，確保加載到測序儀上的文庫是均勻的，有利于提高數據的均一性。

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