人外周血淋巴細胞分離液為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺。適用于從血液分離所需細胞,在醫療和醫學生物學研究中廣泛應用。
其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。
下面讓我們一起來了解一下人外周血淋巴細胞分離液的使用方法與注意事項吧
取新鮮抗凝血1ml,與全血及組織勻漿稀釋液(Cat#:2010C1119)液1:1 混勻后,小心加于2ml的細胞分離液之液面上,以1500-2000轉/分離心(半徑15cm水平轉子)15分鐘,此時離心管中由上至下細胞分四層。
一層;為血漿層。
第二層;為環狀乳白色淋巴細胞。
第三層;為透明分離液層。
第四層;為紅細胞層,收集第二層細胞放入含細胞洗滌液(Cat#:2010X1118)4-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉/分離心10-30分鐘。沉淀經反復洗2次即得所需細胞。(此方法效果較好,推薦使用)
注意事項
1. 啟封后應置4℃保存避免微生物的污染。
2. 細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。
3. 整個分離過程中,溫度應控制在18-28℃且在無菌環境下,避免微生物的污染,否則會影響分離質量。
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