相關定義:
液態(tài)活檢是指通過取樣腦脊液、唾液、胸水、血液、腹水、尿液等對疾病進行診斷,能在一定程度上避免組織異質性對腫瘤分子分型的影響。目前,基于血液的液態(tài)活檢是最主要的研究方向,主要檢測血液中游離的循環(huán)腫瘤 DNA(ctDNA)、循環(huán)腫瘤細胞(CTC)、外泌體(Exosome)和微小核糖核酸(miRNA)。
技術前景:
隨著靶向藥物與免疫治療成為癌癥治療領域的受捧對象,液體活檢這一檢測技術備受關注。與傳統(tǒng)的組織活檢相比,液體活檢以微創(chuàng)和可重復的方式檢測和表征腫瘤的能力可能具有相當大的臨床意義,而且在開發(fā)能夠做到這一點的設備方面已經取得了巨大進展。
技術分類:
ctDNA/cfDNA
帶有腫瘤組織基因突變信息的 ctDNA 由腫瘤細胞釋放到血液中,它被包含在游離DNA(cf-DNA)當中,是腫瘤患者cf-DNA中的一部分。近年來ctDNA的研究取得了較大進展,ctDNA檢測能夠檢測到包含點突變(SNV)、短片段插入缺失(Indel)、融合基因(Fusion)、拷貝數變異(CNV)等各類基因突變信息。
CTC
CTC是存在于外周血中的各類腫瘤細胞的統(tǒng)稱。隨著實體腫瘤的生長,在病灶周圍微環(huán)境發(fā)生特定變化時,將促使一部分腫瘤細胞獲得異常的活動能力,這些細胞從原發(fā)腫瘤上脫落,搭乘血液系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)去往身體各處,通常包含更多的信息,更完整的轉錄組、蛋白表達等,可以為臨床提供有用的信息。
外泌體
腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了腫瘤的生長與侵襲,檢測血液中的外泌體有助于了解更多腫瘤相關的信息。
microRNA
microRNA作為新型診斷標志物近年來被廣泛研究,它可作為腫瘤發(fā)生的早期指標。具有多種重要調節(jié)作用,可通過與靶基因結合方式調節(jié)基因表達,在癌癥的化療耐受、腫瘤的轉移和復發(fā)等過程中扮演重要角色。
技術優(yōu)勢:
1.與人體腫瘤負荷高度相關、針對性強;
液體活檢標志物的半衰期很短,時效性較強。有研究表明 ctDNA 的半衰期僅不足 2 小時,這使得其可以精確反映腫瘤實時信息。
2.標本獲取容易;
組織活檢通常需要外科手段進行組織的獲取,在獲取組織的同時,可能存在出血、疼痛、感染、腫瘤播散等風險。相比于傳統(tǒng)組織活檢,液體活檢最顯而易見的優(yōu)勢就是無創(chuàng)易獲取,對位置要求低,可操作性強,痛苦小,患者接受度更高。
3.檢測周期短、連續(xù)性好;
液體活檢由于其靈活無創(chuàng)的特點,可重復性強,故可以實現對于復發(fā)、療效或耐藥的動態(tài)監(jiān)測。影像學的提示往往會滯后,并且僅能顯示腫瘤形態(tài)的變化,對于腫瘤內部如不同亞克隆間的消長無法分析,而且頻繁的檢測也有輻射帶來的危害。
4.覆蓋病種多,能監(jiān)測多種癌癥;
液體活檢取自循環(huán) DNA 分子,理論上更全面,異質性偏差更低。如果結合組織活檢和液體活檢,則可進一步提高陽性率,使更多患者獲益。
常用實驗技術:
液體活檢技術主要包括數字 PCR(dPCR)、實時定量 PCR(qPCR)和二代測序(NGS)三種。其中,dPCR 通常用于單位點檢測;qPCR 用于單基因多位點檢測;NGS 則可同時檢測大量基因的不同突變類型。
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