人外周血淋巴細胞分離液嚴格無菌、無毒、極低內毒素、不影響細胞生物學功能,人外周血淋巴細胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細胞的分離,也適用于大多數哺乳動物單個核細胞的分離。
下面讓我們一起來了解一下人外周血淋巴細胞分離液操作技術相關的注意事項:
⑴ 嚴格按照人外周血淋巴細胞分離液試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
(5)合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
(9)應保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。