血清儲(chǔ)存以及解凍注意事項(xiàng)

需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃至-70℃低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過一個(gè)月。  

由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱，必須預(yù)留定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?nbsp; 

瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：  

1、-20℃至-70℃血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天；  

2、然后移入室溫或者可以置于37℃水浴中，不斷搖動(dòng)待全部溶解后再分裝。  

注意：  

1、在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與血清成分均一，減少沉淀的發(fā)生；  

2、切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀；  

3、若一次無法用完一瓶，無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。  

1）血清化凍為什么是渾濁的？  

血清制備過程中會(huì)保留部分纖維蛋白原，化凍過程中纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，使血清中出現(xiàn)渾濁，絮狀物。這種情況不影響血清的功效。  

血清化凍過程中，在37℃水浴中放置時(shí)間過長(zhǎng)，也會(huì)導(dǎo)致沉淀產(chǎn)生，沉淀物包含磷酸鈣結(jié)晶。沉淀物也不影響血清功效。  

去除方法：  

可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，將上清液加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。也可直接過濾血清以去除這些絮狀物。  

2）血清熱滅活（除非必須，一般不建議作此熱處理）  

血清為何要滅活？  

血清熱滅活是將血清置于56℃水浴至*解凍。可滅活其中補(bǔ)體系統(tǒng)中具有蛋白酶活性的成分。補(bǔ)體是免疫系統(tǒng)的成分。對(duì)于那些培養(yǎng)困難的細(xì)胞、用于病毒檢測(cè)的細(xì)胞、用于細(xì)胞毒性檢測(cè)很重要，可避免補(bǔ)體帶來的不利影響。單熱滅活也破壞血清中的生長(zhǎng)因子，所以除非必需，血清才滅活處理。  

啟動(dòng)的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。  

血清滅活的正確方法  

(1)按照前面的介紹正確化凍；  

(2)水浴預(yù)熱56℃。水量要足夠，水深要超過瓶中血清的高度；  

(3)輕輕搖動(dòng)已解凍的血清，置于水浴中，水位可能會(huì)下降；  

(4)待水溫重新到56℃時(shí)，再計(jì)時(shí)30分鐘；  

(5)從水浴中拿出血清，待冷卻。-20/-70℃存放。