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      CAR-T 細胞治療:負選EasySep Enrichment Kit

      更新時間:2018-01-18瀏覽:4983次

      CAR-T 治療:T細胞分選EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit

       

      免疫細胞治療

          人免疫系統(immune system)是防衛病原體入侵zui有效的武器,具有以下功能:

      免疫防御:識別和清除外來入侵的抗原,如病原微生物等。

      免疫監視:識別和清除體內發生突變的腫瘤細胞或其他有害的成分。

      免疫自穩:識別和清除體內變性、衰老、死亡的細胞,維持體內環境相對穩定

       

      免疫細胞治療是一種將患者自體的免疫細胞在體外培養、活化、擴增,再回輸入患者體內,利用患者自身免疫細胞殺傷腫瘤細胞進行治療的生物治療技術。

       

      免疫細胞治療惡性腫瘤一直是醫學界研究的熱點,相對于傳統腫瘤治療(手術、化療、放療),優勢已經越來越明顯,在一些腫瘤疾病類型上,甚至已經取代傳統的治療手段,成為一線治療方法,比如這幾年的研究大熱點CAR-T治療,在治療血液性腫瘤上面取得了突破性的成績,國內外制藥大公司注冊的CAR-T臨床試驗高達百個。

          

      免疫細胞

                       

       CAR-T細胞               NK細胞      CIK細胞                       

       

      CAR-T免疫細胞治療模式

       

       

      CAR-T免疫細胞療法流程的相關階段

      病人來源的T細胞樣本(PBMC等)——T細胞分離分選——CAR-T細胞活化、擴增,基因工程改造——CAR-T細胞回輸

       

      CAR-T是一種通過基因工程改造T細胞對白血病的血液腫瘤細胞進行攻擊的免疫療法。截止去年十月,已有諾華和Kite兩家公司獲得FDA認證的唯二基因療法。CAR-T免疫細胞療法大熱中。這兩個臨床成功的CAR-T療法都對來自病人的外周血進行磁珠分選篩選T細胞。Stemcell的EasySep™T細胞富集分選試劑盒可以用于CAR-T療法的T細胞分選階段(免疫磁珠細胞分選法)。EasySep™T細胞富集分選試劑盒磁珠分選采用負選方式,可以避免標記T細胞,以防標記抗體對T細胞造成傷害,zui大程度保持T細胞的untouched活性,立即用于下游CAR-T研究。

      T細胞負選方案介紹

      在負選時,非目標細胞通過針對細胞表面抗原的抗體被去除。負選試劑中的抗體組合確定哪些細胞被去除。

      以下情況,比較適合負選:

      需要未經標記的細胞

      若將抗體結合到目標細胞上會造成抑制或活化,影響下游研究

      目標細胞沒有特異性抗體可用來標記

      需要去除某些類型的細胞

       

      EasySep™T細胞富集試劑盒

      EasySep™T細胞富集試劑盒可用于從新鮮或凍存外周血單個核細胞中通過負選方式分離T細胞。不需要的細胞被識別非T細胞的四聚體抗體復合物(Tetrameric Antibody Complexes)和dextran包被的磁珠標記后移除。被標記細胞不需要過柱,使用EasySep™磁極就能簡單分離。需要的細胞被倒到新管子。分離細胞可以立即用于下游:流式細胞術、細胞培養(CAR-T免疫療法)或DNA/RNA提取。

      推薦使用新版EasySep™T細胞分選試劑盒貨號:17951)短至8分鐘即可完成免疫磁珠細胞分選。

      EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit targets non-T cells for removal with antibodies recognizing specific cell surface markers. Unwanted cells are labeled with antibodies and magnetic particles, and separated without columns using an EasySep™ magnet. Desired cells are simply poured off into a new tube. Isolated cells are immediay available for downstream applications such as flow cytometry, culture, or DNA/RNA extraction. 

       

      基本信息

      中文名稱 EasySep™T細胞富集試劑盒

      英文名稱 EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit

       

      用于標記1 x 109個細胞

      EasySep™T細胞富集試劑盒是套裝,包含:

      EasySep™ Human T Cell Enrichment Cocktail(1mL) T細胞富集抗體復合物

      EasySep™ D Magnetic Particles(1mL) 磁珠

      貨號:19051

      保存 2 - 8°C,不能冷凍。

       

      EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit適用樣本

      EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit可用于從各種樣本來源中分選高純度的人T細胞,包括:新鮮或凍存外周血單個核細胞(PBMCs)、白細胞單采術(Leuko Pak)樣本。目標細胞被抗體復合物和磁珠標記,以進行負選。

       

       

      CAR-T免疫細胞療法相關產品

       

      淋巴細胞分離液

      GE Ficoll Paque淋巴細胞分離液是一種無菌、即用型的淋巴細胞分離液,根據外周血中各類細胞在密度梯度離心中呈現不同的密度梯度分布而將全血中的淋巴細胞等單個核細胞進行分離。適用人外周血、骨髓和臍帶血的單個核細胞分離。Ficoll Paque PREMIUM經GMP認證,適合臨床使用。

      GE

      17-1440-02

      Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液

      6×100 ml

      GE

      17-1440-03

      Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴細胞分離液

      6×100 ml

      GE

      17-5442-02

      Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細胞分離液

      6×100 ml

      GE

      17-5442-03

      Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴細胞分離液

      6×100 ml

       

      免疫磁珠分選

      Stemcell免疫磁珠分選

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      Stemcell

      19051

      EasySep Human T Cell Enrichment Kit

      EasySep™T細胞富集試劑盒

      Stemcell

      17951

      EasySep™Human T Cell Isolation Kit,EasySep™人T細胞富集試劑盒的新版

      Stemcell

      17851

      EasySep™ Human CD3 Positive Selection Kit II,T細胞正選

      Stemcell

      18000

      EasySep™磁極

      Stemcell

      20144

      EasySep™Buffer

       

      Miltenyi免疫磁珠分選

      臨床級CART制備方案

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      Miltenyi

      200-070-132

      CliniMACS CD4 Reagent CE

      Miltenyi

      200-070-115

      CliniMACS D8 Reagent

      Miltenyi

      200-070-119

      CliniMACS CD62L Reagent CE

      Miltenyi

      200-070-131

      CliniMACS CD25 Reagent, CE

      Miltenyi

      200-070-146

      CliniMACS CD45RA Reagent

      Miltenyi

      200-070-117

      CliniMACS CD19 Reagent, CE

      Miltenyi

      200-070-118

      CliniMACS CD14 Reagent, CE

      Miltenyi

      200-073-104

      CliniMACS Tubing Set, CE

      Miltenyi

      130-097-184

      CliniMACS Prodigy TS 510 for Research Use

       

      T細胞級亞群的分選

      Miltenyi

      130-091-114

      CD2 MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-050-101

      CD3 MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-098-193

      MACSxpress Pan T Cell Isolation Kit

      1 kit

      Miltenyi

      130-096-535

      Pan T Cell Isolation Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-091-264

      CD6 MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-093-247

      CD28 MicroBead Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-097-095

      Naive Pan T Cell Isolation Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-045-101

      CD4 MicroBeads

      2 mL

      Miltenyi

      130-055-101

      CD4 Multisort Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-096-533

      CD4+T Cell Isolation Kit

      1 kit

      Miltenyi

      130-045-201

      CD8 MicroBeads

      2 mL

      Miltenyi

      130-055-201

      CD8 Multisort Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-096-495

      CD8+ T Cell Isolation Kit去除分選,untouched細胞

      1 kit

      Miltenyi

      130-094-131

      Naive CD4+ T Cell Iso Kit II, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-091-758

      CD62L MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-045-901

      CD45RA MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-046-001

      CD45RO MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-094-302

      CD4+ Central Mem T Cell Isoaltion Kit,human

      1 kit

      Miltenyi

      130-093-244

      Naive CD8+ T Cell Iso Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-045-901

      CD45RA MicroBeads

      2 mL

      Miltenyi

      130-046-001

      CD45RO MicroBeads, human

      2 mL

      Miltenyi

      130-094-412

      CD8+ Memory T Cell Isolation Kit, human

      1 kit

      Miltenyi

      130-042-301

      MidiMACS™ Starting Kits,LS

      1 kit

      Miltenyi

      130-090-329

      MidiMACS™ Starting Kits,LD

      1 kit

      Miltenyi

      130-091-758

      CD62L MicroBeads

      2 mL

      Miltenyi

      130-091-221

      autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer

      6×1.5 L

      Miltenyi

      130-091-222

      autoMACS® Rinsing solution

      6×1.45 L

      Miltenyi

      130-091-376

      autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer

      6×75 mL

       

       

      激活:CAR-T細胞 CIK細胞

      T細胞活化抗人CD3單克隆抗體(Functional,clone: OKT3)可以與TCR復合物結合,激活T細胞。SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 類產品是BioGems品牌下的功能性抗體產品。

      Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 用于活化和擴增人 T 細胞和 T 細胞克隆,以作研究之用。Dynabeads® CD3/CD28 T Cell Expander 提供了活化和擴增 T 細胞的簡單方法,無需抗原呈遞細胞或抗原。 Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 是均勻的 4.5 µm 超順磁珠,與抗 CD3 和抗 CD28 單克隆抗體的優化混合物偶聯。通過使抗 CD3 和抗 CD28 抗體與 Dynabeads® 結合,這種微珠可以提供 T 細胞活化和擴增所需的原始和共刺激信號。

      RetroNectin®重組人纖維蛋白片段CD3單克隆抗體(OKT3)兩者共同作用可以刺激T細胞的增殖和分化

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      PeproTech/BioGems

      05121-25-500

      Anti-Human CD3 mAb (克隆號OKT3)

      500μg

      PeproTech/BioGems

      10311-25-500

      Anti-Human CD28 mAb(克隆號CD28.2)

      500μg

      GIBCO

      11131D

      Dynabeads™ Human T-Activator CD3/CD28 磁珠

      2 mL

      StemCell

      10971

      ImmunoCult™ Human CD3/CD28 T Cell Activator

      2 mL

      StemCell

      10970

      ImmunoCult™ Human CD3/CD28/CD2 T Cell Activator

      2 mL

      PeproTech

      AF-200-02

      重組人IL-2 (Animal Free)

      50ug/

      100ug

      PeproTech

      AF-300-02

      重組人IFN-γ(Animal Free)

      100ug

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      TAKARA

      T100B

      RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

      重組人纖維蛋白片段

      2.5mg

      TAKARA

      T100A

      0.5mg

      TAKARA

      T201

      RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

      重組人纖維蛋白片段,GMP級

      2.5 mg 凍干粉

       

      擴增:免疫細胞培養基

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      Corning

      88-581-CM

      KBM581, serum-free medium for DC and CIK

      DC/CIK 細胞無血清培養基

      1 L/瓶

      StemCell

      10981

      ImmunoCult™-XF T Cell Expansion Medium

      無血清T細胞擴增培養基

      500mL/瓶

      TAKARA

      GT-T551 H3

      淋巴細胞、DC細胞、NK細無血清胞培養基

      1000 ml

       

      檢測

      細胞增殖檢測

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      PeproTech/BioGems

      63310-00-500

       CFSE

        500 mg

       

      細胞凋亡檢測

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      PeproTech/BioGems

      60910-00

      Propidim Iodide Solution

      200 tests

      500 tests

      PeproTech/BioGems

      61410-00

      7-AAD Solution

      200 tests

      500 tests

       

       

      慢病毒檢測

      TAKARA

      632200

      Lenti-X p24 Rapid Titer Kit慢病毒滴度測定 p24 ELISA 試劑盒

      1 kit

      Gibco

      11913-019

      CD 293 無蛋白培養基

      1000 mL

       

       

      CAR-T凍存

      GMP級BioLife Solutions細胞凍存液

      BioLife Solutions

      210102

      CryoStor CS10 Freeze Media 細胞DMSO凍存液

       

      100 mL/瓶

      BioLife Solutions

      202102

      CryoStor CS2 Freeze Media 細胞DMSO凍存液

       

      100 mL/瓶

      BioLife Solutions

      205102

      CryoStor CS5 Freeze Media 細胞DMSO凍存液

       

      100 mL/瓶

       

      細胞凍存袋

      OriGen CryoStore 細胞凍存袋

       

      品牌

      貨號

      產品描述

      包裝

      OriGen

      CS25N

      CryoStore 25 EVA 凍存袋,N型管路

      24個/箱

      OriGen

      CS50

      CryoStore 50 EVA 凍存袋

      24個/箱

      OriGen

      CS250

      CryoStore 250 EVA 凍存袋

      24個/箱

      OriGen

      CS250N

      CryoStore 250 EVA 凍存袋,N型管路

      24個/箱

       

       

      EasySep Human T Cell Enrichment Kit 訂購信息

       

       

      細胞類型

      貨號

      產品名稱

      純度

      適用的染色抗體

      T細胞

      17951

      17951RF

      EasySep Human T Cell Isolation Kit

      EasySep™T細胞分選試劑盒

      96.7 ± 1.5%

      CD2(貨號#60007)

      CD3(貨號#60011)

      CD4(貨號#60016)

      CD8a(貨號#60022)

      CD45(貨號#60018)

      19051

      19051RF

      EasySep Human T Cell Enrichment Kit

      EasySep™T細胞富集試劑盒

      95.0 - 99.0%

       

      說明:RF:貨號后加RF,比如17951RF,代表RoboSep™試劑盒包含EasySep™分選試劑盒、RoboSep™緩沖液和1-2盒RoboSep™槍頭。

      分選試劑盒和富集試劑盒的主要區別:分選試劑盒是富集試劑盒的更新版,實驗耗時更少。

       

      EasySep Human T Cell Enrichment Kit 19051以及更多CAR-T免疫細胞治療GMP級產品華雅再生醫學旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司  :1500 1904 520。紅榮微再-客服: 2395557778  經銷商專員

      紅榮微再以“傳遞科學價值,服務科學研究”為宗旨主營干細胞、醫療、細胞治療、器官再生四大板塊的產品。

       

       

       

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